高电场强度电泳时，除了降低核酸样品的热效应，还需要注意哪些问题？

防止凝胶破裂：高电场强度下，凝胶内部会产生较大的应力，容易导致凝胶破裂。因此，要确保凝胶的制备质量，凝胶浓度均匀、凝固充分；同时，在电泳过程中要避免电泳槽受到震动或碰撞。

避免电极腐蚀：高电场强度可能会加速电极的腐蚀，尤其是在长时间电泳或使用高离子强度缓冲液时。应选择质量好、耐腐蚀的电极，如铂电极；定期检查电极的状况，如有腐蚀及时更换；并且在电泳结束后，及时清洗电极，去除表面的电解质和杂质。

注意安全：高电场强度电泳使用的电压较高，存在触电风险。操作时要确保电泳设备接地良好，使用绝缘手套和护目镜等防护装备；在电泳过程中，不要触摸电泳槽和电极，避免发生触电事故。

考虑核酸分子的构象变化：高电场强度可能会使核酸分子的构象发生变化，从而影响其迁移行为。对于一些特殊结构的核酸分子，如超螺旋 DNA 或具有复杂二级结构的 RNA，可能需要在缓冲液中加入适量的辅助试剂，如尿素、甲酰胺等，以帮助维持核酸分子的天然构象，保证电泳结果的准确性。

防止样品扩散：高电场强度下，样品在凝胶中的扩散速度可能会加快，导致条带变宽，分辨率下降。可通过在样品中加入适量的蔗糖或甘油等密度试剂，增加样品的密度，减少扩散；同时，尽量缩短电泳时间，也有助于降低样品的扩散程度。

准确选择 Marker：由于高电场强度下核酸分子的迁移速度可能与常规条件不同，需要选择合适的分子量 Marker 作为参照。最好选择在高电场强度下迁移行为稳定、条带清晰的 Marker，以便准确判断核酸分子的大小和迁移情况。

确保设备稳定：电泳设备的稳定性对高电场强度电泳至关重要。使用前要检查设备的电源、电极连接等是否正常，避免在电泳过程中出现电压波动或设备故障，影响实验结果。